Estudo de métodos de conservação de raízes de cebolas coradas para confecção de lâminas histológicas

Resumo

A confecção de lâminas histológicas é uma ferramenta útil para a
citogenética vegetal, especialmente para a observação das fases do ciclo
de divisão celular, sendo também utilizada na elaboração de cariograma,
para estudo da morfologia dos cromossomos e identificação de anomalias
cromossômicas. Na confecção das lâminas são utilizados tecidos de
grande atividade mitótica, tal como o meristemático das raízes, que
possui grande volume celular e crescimento rápido, o que o torna a melhor
escolha. As raízes de cebola (Allium cepa) são muito utilizadas por serem
de fácil obtenção, seus cromossomos são grandes, bem visíveis e o
material coletado é facilmente macerado. A escolha do corante depende do
objetivo desejado e do material a ser corado; a orceína acética e o carmim
acético são corantes comumente empregados na confecção dessas lâminas,
assim como o reativo de Schiff, utilizado na coloração de Feulgen. Segundo
a literatura, após a coloração do material, é necessário que seja
realizado, imediatamente, a sua maceração para, posteriormente, ocorrer a
montagem da lâmina, seja ela semipermanente ou permanente. Por outro lado,
não há registros de trabalhos que apresentem uma metodologia para a
estocagem de raízes coradas sem prejuízo para a visualização. O objetivo
deste estudo é encontrar um método de estocagem para raízes coradas com
os corantes carmim acético 2%, orceína acética 1% e reativo de Schiff,
proporcionando lâminas com a mesma qualidade das lâminas confeccionadas
imediatamente após a coloração das raízes. Para tanto, 60 raízes de
cebolas foram coletadas, fixadas com solução Carnoy (3 etanol : 1 ácido
acético) e coradas em soluções dos 3 corantes (20 raízes por corante). A
partir de 2 raízes por corante, duas lâminas foram imediatamente
confeccionadas e, das demais raízes (18 por corante), 6 foram mantidas no
respectivo corante, 6 em ácido acético 45% e 6 em etanol 70%. Das 18
raízes, após 7, 15 e 30 dias, foram confeccionadas duas lâminas
histológicas por forma de estocagem. Estas foram fotografadas e comparadas.
As análises estão sendo realizadas, mas até o momento foi observada perda
da qualidade das células das raízes estocadas em etanol 70%.